以氣體為流動相(稱載氣)的色譜分析法稱氣相色譜法(GC)。氣相色譜儀在石油化工、生物化學(xué)、醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品、環(huán)保等方面應(yīng)用廣泛。主要用于唄分析對象的定量和定性分析。
石油加工: 石油化工,石油地質(zhì),油品組成等分析控制和控礦研究;
生物化學(xué): 臨床應(yīng)用,病理和毒理研究;
中西藥物: 原料中間體及成品分析;
食品發(fā)酵: 微生物飲料中微量組分的分析研究;
有機(jī)化學(xué): 有機(jī)合成領(lǐng)域內(nèi)的成份研究和生產(chǎn)控制;
衛(wèi)生檢查: 勞動保護(hù)公害檢測的分析和研究;
環(huán)境保護(hù): 大氣水源等污染地的痕量毒物分析、監(jiān)測和研究
尖端科學(xué): 軍事檢測控制和研究;
運(yùn)用其進(jìn)行化學(xué)分析的目的:
1.要確定被分析物是什么性質(zhì),即給物質(zhì)定性。
2.要確定被分析物中每個組份的含量的大小,即給物質(zhì)定量。
色譜法起源于20世紀(jì)初,1906年俄國植物學(xué)家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經(jīng)過一段時間洗脫之后,植物色素在碳酸鈣柱中實(shí)現(xiàn)分離,由一條色帶分散為數(shù)條平行的色帶。由于這一實(shí)驗(yàn)將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名色譜法。
溶于流動相中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出,然后利用檢測器依次檢測已分離出來的組分。
☆氣相色譜儀流動相是一種與樣品和固定相都不發(fā)生反應(yīng)的氣體,一般為氮或氫氣。 待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動相,流動相帶著樣品進(jìn)入色譜柱,故流動相又稱為載氣。載氣在分析過程中是連續(xù)地以一定流速流過色譜柱的;而樣品則只是一次一次地注入,每注入一次得到一次分析結(jié)果。樣品在色譜柱中得以分離是基于熱力學(xué)性質(zhì)的差異。固定相與樣品中的各組分具有不同的親合力(對氣固色譜儀是吸附力不同,對氣液分配色譜儀是溶解度不同)。當(dāng)載氣帶著樣品連續(xù)地通過色譜柱時,親合力大的組分在色譜柱中移動速度慢,因?yàn)橛H合力大意味著固定相拉住它的力量大。親合力小的則移動快。
☆檢測器對每個組分所給出的信號,在記錄儀上表現(xiàn)為一個個的峰,稱為色譜峰。色譜峰上的極大值是定性分析的依據(jù),而色譜峰所包羅的面積則取決于對應(yīng)組分的含量,故峰面積是定量分析的依據(jù)。一個混合物樣品注入后,由記錄儀記錄得到的曲線,稱為色譜圖。分析色譜圖就可以得到定性分析和定量分析結(jié)果。
按固定相的幾何形式分為:
1、柱色譜法
是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱,試樣從柱頭到柱尾沿一個方向移動而進(jìn)行分離的色譜法。
2、紙色譜法
是利用濾紙作固定液的載體,把試樣點(diǎn)在濾紙上,然后用溶劑展開,各組分在濾紙的不同位置以斑點(diǎn)形式顯現(xiàn),根據(jù)濾紙上斑點(diǎn)位置及大小進(jìn)行定性和定量分析。
3、薄層色譜法
薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層,然后用與紙色譜法類似的方法操作以達(dá)到分離目的。
按分離原理分為:
1、吸附色譜法:
利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。適于分離不同種類的化合物(例如,分離醇類與芳香烴)。
2、分配色譜法:
利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法。
3、離子交換色譜法:
利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法,利用被分離組分與固定相之間發(fā)生離子交換的能力差異來實(shí)現(xiàn)分離。離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應(yīng)用于無機(jī)離子的分離,而且廣泛地應(yīng)用于有機(jī)和生物物質(zhì),如氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等的分離。
4、尺寸排阻色譜法:是按分子大小順序進(jìn)行分離的一種色譜方法,體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻,較早的淋洗出來;中等體積的分子部分滲透;小分子可完全滲透入內(nèi),最后洗出色譜柱。這樣,樣品分子基本按其分子大小先后排阻,從柱中流出。被廣泛應(yīng)用于大分子分級,即用來分析大分子物質(zhì)相對分子質(zhì)量的分布。
5、親和色譜法:
相互間具有高度特異親和性的二種物質(zhì)之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質(zhì)分離的色譜法。例如利用酶與基質(zhì)(或抑制劑)、抗原與抗體,激素與受體、外源凝集素與多糖類及核酸的堿基對等之間的專一的相互作用,使相互作用物質(zhì)之一方與不溶性擔(dān)體形成共價結(jié)合化合物,用來作為層析用固定相,將另一方從復(fù)雜的混合物中選擇可逆地截獲,達(dá)到純化的目的??捎糜诜蛛x活體高分子物質(zhì)、過濾性病毒及細(xì)胞。
主要包括五大系統(tǒng):載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)?;玖鞒倘缦拢?/span>
---未完待續(xù)---